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細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑
11668019賽默飛Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑現(xiàn)貨

產(chǎn)品型號:11668019
更新時間:2025-12-19
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:6
服務(wù)熱線0571-88637571
賽默飛Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑現(xiàn)貨
在分子與細(xì)胞生物學(xué)研究中,將外源核酸(如質(zhì)粒DNA、siRNA、mRNA)高效導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞是進(jìn)行功能研究、基因編輯或重組蛋白表達(dá)的關(guān)鍵步驟。在眾多轉(zhuǎn)染方法中,陽離子脂質(zhì)體法因其操作相對簡便、適用細(xì)胞范圍廣而成為實(shí)驗(yàn)室的常用選擇。其中,Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑作為該技術(shù)路線下的經(jīng)典產(chǎn)品之一,以其廣泛驗(yàn)證的可靠性和較高的轉(zhuǎn)染效率,在諸多細(xì)胞系研究中得到了應(yīng)用。
Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,通常指的是Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染試劑,其核心成分為專有的陽離子脂質(zhì)混合物。其工作原理是通過帶正電的脂質(zhì)體與帶負(fù)電的核酸分子自發(fā)形成復(fù)合物。這些復(fù)合物通過內(nèi)吞等途徑進(jìn)入細(xì)胞后,能夠?qū)⒑怂嵊行п尫诺郊?xì)胞質(zhì)中,從而實(shí)現(xiàn)基因的瞬時表達(dá)或沉默。
一、核心特點(diǎn)與產(chǎn)品規(guī)格要點(diǎn)
作為一款成熟的轉(zhuǎn)染試劑,Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑在設(shè)計(jì)上注重標(biāo)準(zhǔn)化與可重復(fù)性。其主要特點(diǎn)與常見的規(guī)格考量如下:
優(yōu)化的配方與較高的轉(zhuǎn)染效率:該試劑的脂質(zhì)配方經(jīng)過優(yōu)化,旨在與核酸形成大小均一、表面電荷穩(wěn)定的復(fù)合物,有助于提高多種常見貼壁細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率。
適用于多種核酸類型:Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不僅可用于質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染,也適用于將小于擾RNA(siRNA)或微小RNA模擬物/inhibitor導(dǎo)入細(xì)胞,進(jìn)行基因功能缺失研究。
操作流程相對標(biāo)準(zhǔn)化:其標(biāo)準(zhǔn)操作方案通常建議使用無血清培養(yǎng)基(如Opti-MEM)稀釋試劑與核酸,混合孵育形成復(fù)合物后,直接加入細(xì)胞培養(yǎng)基中。流程經(jīng)過大量驗(yàn)證,有助于新用戶快速建立方法。
對細(xì)胞毒性的考量:作為一種化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,其對細(xì)胞的毒性是需要平衡的因素。通常建議在轉(zhuǎn)染后一定時間(如4-6小時)更換為培養(yǎng)基,以減輕對細(xì)胞狀態(tài)的影響。
包裝規(guī)格的實(shí)用性:產(chǎn)品通常提供不同規(guī)格的包裝,例如0.75mL、1.5mL及更大體積裝,以適應(yīng)從少量篩選實(shí)驗(yàn)到大規(guī)模穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的不同需求。建議根據(jù)使用頻率選擇,并注意按要求儲存。
二、與其他轉(zhuǎn)染試劑的主要規(guī)格區(qū)別
在選擇轉(zhuǎn)染策略時,了解Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑與同類其他試劑的區(qū)別有助于精準(zhǔn)決策。其主要區(qū)別點(diǎn)通常體現(xiàn)在:
應(yīng)用側(cè)重與細(xì)胞類型兼容性
Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑:在剛推出時,以其對多種常見細(xì)胞系(如HEK293、HeLa、COS-7等)較高的DNA轉(zhuǎn)染效率而著稱。它對于siRNA轉(zhuǎn)染也有效,但并非專門為RNA優(yōu)化。
對比專門試劑:后續(xù)推出的Lipofectamine3000在DNA轉(zhuǎn)染效率上有所提升,并提供了增強(qiáng)劑以改善在某些難轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的表現(xiàn)。而LipofectamineRNAiMAX則是專門為siRNA/miRNA轉(zhuǎn)染優(yōu)化的試劑,在沉默效率和細(xì)胞毒性方面可能對RNA遞送更具優(yōu)勢。
操作流程與復(fù)合物形成條件
Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑:采用相對簡單的兩步法,將試劑和核酸分別稀釋于無血清培養(yǎng)基中,然后混合。
對比更新試劑:一些新試劑(如Lipofectamine3000)引入了額外的組分(如P3000增強(qiáng)劑),并可能推薦不同的復(fù)合物孵育時間或DNA/試劑比例,旨在進(jìn)一步提升轉(zhuǎn)染性能。
對血清的耐受性
Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑:標(biāo)準(zhǔn)操作要求在復(fù)合物形成和加入細(xì)胞時使用無血清培養(yǎng)基,以獲得效果。
對比特定試劑:市面上也存在一些宣稱可在有血清條件下直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染的試劑,這可能為某些實(shí)驗(yàn)流程提供便利。
三、應(yīng)用建議與優(yōu)化方向
Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑常用于以下場景:
質(zhì)粒DNA的瞬時轉(zhuǎn)染:用于報告基因檢測、過表達(dá)功能研究、病毒包裝等。
siRNA介導(dǎo)的基因敲低:用于基因功能缺失分析。
為了獲得理想結(jié)果,建議用戶進(jìn)行條件優(yōu)化:
細(xì)胞狀態(tài):確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞處于對數(shù)生長期,密度適宜(通常為60-80%融合度)。
核酸質(zhì)量與用量:使用高純度、無菌的核酸,并針對目標(biāo)細(xì)胞系測試不同用量。
試劑比例:嚴(yán)格按照說明書推薦的范圍測試試劑與核酸的比例,這是優(yōu)化的關(guān)鍵。
復(fù)合物孵育時間:遵循建議的孵育時間(通常20-30分鐘),避免過長。
細(xì)胞類型驗(yàn)證:對于新的或難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確認(rèn)其適用性。有時需要嘗試更新型的專用試劑。
總結(jié)
總而言之,Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑作為一款經(jīng)過長期實(shí)踐驗(yàn)證的轉(zhuǎn)染工具,為常規(guī)哺乳動物細(xì)胞的核酸遞送提供了一個相對可靠且標(biāo)準(zhǔn)化的解決方案。其價值在于操作的簡便性和對多種細(xì)胞及核酸類型的廣泛適用性。然而,隨著技術(shù)進(jìn)步,更高效或更專一的轉(zhuǎn)染試劑不斷涌現(xiàn)。在實(shí)際研究中,理解其核心特點(diǎn)、掌握優(yōu)化方法,并根據(jù)具體的細(xì)胞類型、核酸種類及實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo),與Lipofectamine家族其他成員或市面同類產(chǎn)品進(jìn)行比較選擇,是實(shí)現(xiàn)高效、低毒轉(zhuǎn)染的成功關(guān)鍵。對于剛建立轉(zhuǎn)染平臺的實(shí)驗(yàn)室,Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑仍是一個不錯的起點(diǎn)。
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